Efeitos da fotobiomodulação sobre a adesão e metabolismo de osteoblastos, fibroblastos e células epiteliais sobre superfícies de titânio in vitro

Abstract

A migração e adesão de osteoblastos bem como a síntese de matriz mineralizada são de suma importância para osseointegração dos implantes orais. Por sua vez, a formação de um selamento biológico efetivo é essencial para a longevidade deste tratamento e depende diretamente da adesão de células da mucosa oral à superfície dos componentes protéticos dos implantes (abutments). A fotobiomodulação tem sido usada com o intuito de melhorar a adesão e proliferação celular em regiões perimplantares. O objetivo deste estudo foi avaliar a influência da aplicação da fotobiomodulação utilizando laser de baixa intensidade (LBI) e diodos emissores de luz (LED) sobre células dos tecidos ósseo e mucoso cultivadas sobre discos de titânio usinado (Ti). Foram utilizadas linhagens celulares humanas de osteoblastos (SaOs-2), fibroblastos (HGF) e células epiteliais (NOK). Estas células foram cultivadas sobre os discos de Ti na densidade de 5x104 células/disco mantidas em meio de cultura (DMEM) suplementado com solução antibiotica/antimicótica e 10% de soro fetal bovino (SFB). Após 24 horas, o meio de cultura foi substituído por meio livre de SFB e as células foram submetidas ás irradiações. Foram realizadas 3 (três) irradiações, com intervalos de 24 horas, na densidade de energia de 3J/cm2 , com área de irradiação de 2cm2 e distância de 2,5cm, utilizando dispositivos especialmente desenvolvidos para cultura de células. Para a LBI, foi utilizado o dispositivo LaserTABLE, no comprimento de onda de 780nm e irradiância de 25mW, enquanto para a luz de LED, o dispositivo LEDTABLE foi aplicado, nos parâmetros de 810nm, 20mW. Após as irradiações, foi determinado o número de células aderidas ao substrato de Ti e espraiamento, por meio de fluorescência direta. A viabilidade celular foi avaliada pelo ensaio de Alamar Blue e também foram avaliadas a síntese de proteína total e de colágeno, bem como atividade de fosfatase alcalina (ALP) pelos osteoblastos. Os dados foram submetidos à análise estatística pelos testes de ANOVA One Way complementado por Tukey, com nível de significância de 5%. A adesão das células epiteliais foi significativamente afetada pela fototerapia, enquanto para as outras células esta adesão não foi significativamente afetada. A viabilidade também foi positivamente influenciada pelo LBI e LED, bem como a síntese de proteína total e colágeno, de forma distinta para cada tipo celular. A atividade de ALP foi estimulada apenas para o grupo submetido a LBI. Desta forma, a aplicação da fototerapia pode resultar em melhora nas funções celulares relacionadas ao processo de reparo peri-implantar.