Fenilpropanóides em Eclipta prostrata (L) L.: ação de elicitores e comprovação da rota biossintética
| dc.contributor.advisor | Lourenço, Mirian Verginia | |
| dc.contributor.author | Souza, Giuliana Rosana da Silva | |
| dc.contributor.coadvisor | Lopes, Adriana Aparecida | |
| dc.coverage.spatial | Ribeirão Preto | |
| dc.date.accessioned | 2025-06-05T12:14:35Z | |
| dc.date.issued | 2020 | |
| dc.description | Eclipta prostrata is a medicinal plant, from the Asteraceae family, which has several pharmacological properties, such as anti-phallic, anti-hepatotoxic and anticancer, attributed to the cumestans and flavonoids present in it. The interaction of plants with Agrobacterium rhizogenes give rise to roots in hair or hairy roots and these are widely used in studies related to secondary plant metabolism. The use of hairy roots, associated or not with the addition of elicitors in cultures, has become an important tool in the establishment of systems for the production of pharmacologically active molecules. Thus, this work aimed to evaluate the effect of elicitors on the production of phenylpropanoids, by hairy roots of E. prostrata. For this, hairy roots cultures maintained in vitro in liquid MS medium, received different concentrations (50, 100 or 150 µM) of the elicitors methyl jasmonate (MJ) and salicylic acid (AS), in addition to yeast extract (EL) (10 , 20 or 30 mg / 100 mL) and wall homogenate (HP) of the fungus Lasiodiplocia pseudotheobromae (2.5, 6.25 or 12.5 mg / 100 mL). The cultures were collected 4, 8, and 12 days after the addition of the agents, when they were then dried in an oven and subjected to extraction of the target metabolites. The quantification of the target metabolites (wedelolactone-WL, demethylwedelolactone - DWL and 3,5-Di-O-caffeoylquinico-3,5-diCQA) present in the extracts was performed by HPLC. Quantitative analyzes made it possible to verify that the addition of MJ, EL and HP in the hairy roots cultures of E. prostrata promoted an effect mainly on the production of 3,5-diCQA acid. Through polynomial regression analyzes the ideal concentrations to be added are 92.62 µM MJ, 17.69 mg EL and 8.82 mg HP. Elicitor AS, on the other hand, stimulated the production of cumestane DWL more, being determined through polynomial regression that the optimum concentration should be 62.13 µM. However, for cumestano WL the elicitors used did not have any effect on production. The use of precursors labeled 2-13C-sodium acetate and 3-13C phenylalanine proved that the operative metabolic pathway of 3,5-diCQA is that of chiquimate, whereas that of cumestans WL and DWL is the acetate pathway. In addition, the intensity of marking suggests that DWL is a precursor to WL. This study provided results that enable the determination of production systems for 3,5-diCQA and DWL compounds from hairy roots of E. prostrata using specific elicitors for each compound alone. | |
| dc.description.abstract | Eclipta prostrata é uma planta medicinal, da família Asteraceae, que apresenta diversas propriedades farmacológicas, tais como antiofídica, antihepatotóxica e anticâncer, atribuídas aos cumestanos e flavonoides presentes na mesma. A interação de plantas com o Agrobacterium rhizogenes dão origem à raízes em cabeleira ou hairy roots e estas são amplamente utilizadas em estudos relacionados ao metabolismo secundário vegetal. O uso de hairy roots, associado ou não à adição de elicitores nas culturas, tem se tornado uma ferramenta importante no estabelecimento de sistemas de produção de moléculas farmacologicamente ativas. Assim, este trabalho teve por objetivo avaliar o efeito de elicitores sobre a produção de fenilpropanóides, por hairy roots de E. prostrata. Para isso, culturas de hairy roots mantidas in vitro em meio MS liquido, receberam diferentes concentrações (50, 100 ou 150 µM) dos elicitores metil jasmonato (MJ) e ácido salicílico (AS), além de extrato de levedura (EL) (10, 20 ou 30 mg/100 mL) e homogenato de parede (HP) do fungo Lasiodiplocia pseudotheobromae (2,5; 6,25 ou 12,5 mg/100 mL). As culturas foram coletadas 4, 8, e 12 dias após a adição dos agentes, quando então foram secas em estufa e submetidas a extração dos metabólitos alvo. A quantificação dos metabólitos alvo (wedelolactona - WL, demetilwedelolactona - DWL e ácido 3,5-Di-O caffeoylquinico- 3,5-diCQA) presentes nos extratos foi realizada por HPLC. As análises quantitativas possibilitaram verificar que a adição de MJ, EL e HP nas culturas de hairy roots de E. prostrata promoveu efeito principalmente sobre a produção do ácido 3,5-diCQA. Através de análises de regressão polinomial as concentrações ideais a serem adicionadas são de 92,62 µM de MJ, 17,69 mg de EL e 8,82 mg de HP. Já elicitor AS estimulou mais a produção do cumestano DWL, sendo determinado através de regressão polinomial que a concentração ótima deverá ser 62,13 µM. No entanto, para o cumestano WL os elicitores utilizados não causaram efeitos sobre a produção. O uso dos precursores marcados 2-13C-acetato de sódio e 3-13C-fenilalanina comprovaram que a via metabólica operante do 3,5-diCQA é a do chiquimato, enquanto que dos cumestanos WL e DWL é a via do acetato. Além disso a intensidade de marcação sugere que DWL é precursora da WL. Esse estudo proporcionou resultados que possibilitam a determinação de sistemas de produção dos compostos 3,5-diCQA e DWL a partir de hairy roots de E. prostrata utilizando elicitores específicos para cada composto isoladamente. | |
| dc.format.extent | 43 f. | |
| dc.identifier.uri | https://repositorio.unaerp.br/handle/12345/633 | |
| dc.language.iso | pt_BR | |
| dc.subject | Eclipta | |
| dc.subject | Asteraceae | |
| dc.subject | Flavonóides | |
| dc.subject | Hairy roots | |
| dc.title | Fenilpropanóides em Eclipta prostrata (L) L.: ação de elicitores e comprovação da rota biossintética | |
| dc.type | Dissertação |