Análise proteômica de Trichophyton rubrum na relação fungo hospedeiro e na resposta a moléculas com atividade antifúngica

Abstract

Trichophyton rubrum representa o agente etiológico mais comum das micoses humanas, sendo responsável por mais de 69,5% de todas as dermatofitoses. Apesar da alta prevalência de dermatofitoses em todo o mundo, ainda é escasso o conhecimento dos mecanismos moleculares envolvendo a interação fungo-hospedeiro. Os modelos de infecção para estudo de interação dermatófito-hospedeiro ainda são limitados, mas a ferramenta de meio de cultura adicionado de substratos proteicos, vem se destacando pelo fato dos dermatófitos utilizarem a queratina como fonte de nutriente. O uso do meio de cultura contendo queratina pode simular a infecção superficial e a análise proteômica torna possível a identificação global de proteínas relacionadas com a patogenicidade de dermatofitos. Este trabalho realizou a análise proteômica a partir do crescimento de T. rubrum em diferentes meios de cultivo contendo queratina e exposto a presença dos compostos antifúngicos: trans-chalcona e um análogo de curcumina. A cromatografia líquida com espectrometria de massa em tandem (LC-MS/MS) identificou 895 proteínas expressas em Meio Mínimo (MM), 348 expressas em Meio Mínimo contendo Queratina (MQ), 238 em Meio Mínimo contendo queratina + trans-chalcona (MQTC) e 276 em Meio Mínimo contendo queratina + curcuminoide (MQCur). Dentre as proteínas mais abundantes encontradas em todos os meios, destaca-se a classe de proteínas de choque térmico (HSPs) que estão envolvidas na interação patógeno- hospedeiro e desempenham um papel importante durante a infecção fúngica de tecidos queratinizados. Além disso, a tioredoxina foi abundante principalmente na presença de queratina, sendo descrita como um possível novo alvo antifúngico. A protease Vacuolar A foi exclusiva na presença dos dois compostos antifúngicos e a proteina contendo domínio hidro SGNH, foi abundante apenas em meio contendo o curcuminoide. A modulação diferencial de proteínas sugere que o fungo apresente capacidade de remodelamento de acordo com as necessidades nutricionais encontradas e pelo estresse causado pelos compostos antifúngicos. Além dessas proteínas já conhecidas, foram identificadas diversas proteínas ainda não caracterizadas funcionalmente, como as proteínas F2SL44_TRIRC e F2SUJ4_TRIRC. E as proteínas F2SMI7_TRIRC e F2SSX3_TRIRC, cujos genes que já haviam sido evidenciados anteriormente em nosso grupo de pesquisa, agregando dados funcionais sobre elas.